При обработке образцов полученный материал тщательно осматривается, измеряется и описывается. Диагностически ценные участки берут по мере необходимости.

Целями обработки являются:

идентифицикация образца, определение его ориентации и измерение;
определение наличия, расположения и размеров любых образований (опухолей, кальцинатов и т.д.);
оценка расстояния от очагов образования от края иссечения;
отбор диагностически ценных срезов для более точной микроскопической оценки;
отбор срезов из других локаций в зависимости от типа образца (например, соска, всех квадрантов и лимфатических узлов, связанных с мастэктомией).

Подготовка
Прежде чем приступить к обработке образца, важно:

просмотреть соответствующую клиническую информацию;
просмотреть предыдущие отчеты о цитологическом исследовании или биопсии, если таковые имеются;
просмотреть соответствующие рентгенологические заключения;
подготовить схему образца и, если возможно, получить фотографии образца.

Идентификация образцов

Сопоставить образец с личными и клиническими данными пациентки, указанными в форме заявки.
Подсчитать количество образцов.
Присвоить образцу уникальный идентификатор лабораторного образца. Обычно это последовательная система нумерации, начиная с единицы (1) и заканчивая последним экземпляром каждого года. Таким образом, случай 57/21 является 57-м гистопатологическим образцом в 2021 году. Если в один и тот же день получено более одного образца от одного пациента, ему в этом случае присваивается номер 57(1)/21, 57(2)/21 и т.д., чтобы экземпляр имел уникальный идентификатор.
Обратить внимание на тип образца.
Обратить внимание на тип и расположение образований.
Отметить дату и время взятия материала у пациентки.
Обратить внимание на дату и время помещения в раствор формалина. (Время фиксации после операции, называемое временем холодовой ишемии, должно составлять менее 1 часа.)

Ориентация образца

Найдите ориентировочные швы, наложенные на образец во время операции (также просмотрите заметку хирурга в форме заявки). Образцы лампэктомии обычно ориентированы длинным швом латерально и коротким швом вверху. При модифицированной радикальной мастэктомии (МРМ) для ориентации служат кожный лоскут с соском и ареолой, видимый спереди, и подмышечная клетчатка с лимфатическими узлами, видимыми сбоку.
Взвесьте образец и запишите вес.
Запишите размеры всего образца в трех измерениях в сантиметрах.

Нанесение чернил на края
Чернила наносятся на края для микроскопического определения хирургической плоскости иссечения. Можно использовать любые водостойкие чернила, например, китайскую тушь или краску для ткани.

При лампэктомии нанесите чернила на всю внешнюю поверхность.
При образце мастэктомии наносите чернила только на все основание, поскольку соответствующий хирургический край — задний (глубокий).
Сначала высушите образец промокательной бумагой, затем закрасьте все соответствующие хирургические края и снова промокните насухо.
Наносите чернила осторожно кистью, так как слишком сильное нанесение может привести к просачиванию чернил в образец.

Нарезка образца
Образцы нарезаются для облегчения фиксации.

Пальпируйте интактный образец.
Чтобы зафиксировать очаг образования, зажмите его между большим и указательным пальцами, а затем сделайте надрез через центр очага, чтобы полностью обнажить очаг образования.
Затем последовательно нарежьте образец, чтобы продемонстрировать ближайший край в радиальном направлении.
Образцы после мастэктомии следует нарезать последовательно перпендикулярно коже с интервалом 1 см от задней поверхности иссеченной МЖ.

Фиксация образца

В качестве фиксатора используйте 10% нейтрально забуференный формалин; pH следует поддерживать на уровне 7,2–7,4.
После нарезки как можно скорее погрузите образец в фиксатор, чтобы обеспечить достаточное проникновение фиксатора.
Нарезанные образцы МРМ следует завернуть в марлю и зафиксировать в формалине на ночь.
Рекомендуемое время фиксации составляет минимум 6 часов и максимум 72 часа.
Согласно действующим рекомендациям Коллегии американских патологов/Американского общества клинической онкологии, даже небольшие образцы, такие как образцы core-биопсии, следует фиксировать в формалине 6–48 часов.
Несоблюдение условий фиксации ткани МЖ может привести к ложным результатам ИГХ: недостаточная – к ложноотрицательным результатам ER, а чрезмерная фиксация - к ложноположительным результатам HER2.

Измерение размеров образца

Для core-биопсии запишите количество образцов и длину каждого образца в миллиметрах.
Используйте схемы образцов, структурированные контрольные списки и стандартные шаблоны для записи характеристик образца.
Отметьте размер опухоли в трех измерениях и минимальное расстояние от края.
Опишите консистенцию и отметьте наличие некроза, фиброза, кист (количество, размер, содержимое) и кальцинатов.
Опишите любые грубые аномалии кожи и сосков или наличие любого рубца, места или полости, ранее проведенной биопсией.
Отметьте, являются ли края скошенными или радиальными (перпендикулярными).

Увеличение подмышечных лимфатических узлов

Определите все лимфатические узлы и посчитайте их.
Определите грубые метастазы в узлах, если они есть, запишите их количество, измерьте и отправьте только один репрезентативный срез от каждого для документирования образования. Полностью непораженные узлы следует нарезать тонкими срезами толщиной 2 мм вдоль их длинной оси и полностью закрепить. Узлы около 5 мм следует разделить пополам и пропитать. Узлы < 5 мм должны пропитываться целиком.
Не включайте более одного срезанного лимфатического узла в каждую кассету, чтобы избежать ошибок при подсчете лимфатических узлов.

Отбор образцов

Из всех полученных образцов следует сделать соответствующие срезы, чтобы из них можно было получить диагностически ценную информацию.
Поскольку каждый взятый срез дополнительно перерабатывается в парафиновый блок, важно придерживаться уникального идентификатора на протяжении всего процесса. Следовательно, срезы должны быть представлены в рамках соответствующего протокола вместе с диаграммой, показывающей, откуда взяты срезы.
Обычно части образца обозначаются в алфавитном порядке: область опухоли (А), сосок/кожа (В), край разреза (С), непораженная ткань МЖ (D), лимфатические узлы (Е), кусочек замороженного среза (FS), и ответная часть замороженного участка (CP).
Если срезов вышеупомянутых подразделов несколько, то к обозначенной букве алфавита добавляются последовательные номера. Следовательно, если даны четыре среза области опухоли, они будут обозначены как А1, А2, А3 и А4. Аналогично, подмышечные узлы будут обозначены как E1, E2, E3 и так далее.
Все взятые срезы затем помещаются на доску с соответствующими метками.
Патологоанатом должен нарисовать схему каждого среза на бланке, прилагаемом к форме патологии. Лаборант должен сверить количество срезов со схемой, прежде чем укладывать их в кассеты с соответствующей этикеткой.
Затем лаборант записывает количество кассет, приготовленных для этого конкретного образца.
Кассеты следует поместить в банки с формалиновым фиксатором, хранящиеся в помещении для обработки.
Очень маленькие срезы следует завернуть в фильтровальную бумагу (например, Whatman № 1), помеченную соответствующим идентификатором, и поместить в кассеты, чтобы предотвратить потерю ткани во время обработки.
Срезы тканей не должны быть слишком большими или помещаться в кассеты с усилием. Размер срезов ткани не должен быть очень большим, и в одну кассету не следует помещать много срезов ткани. Это обеспечит свободный ток реагентов в кассете на срез ткани во время обработки.
Толщина ткани должна быть одинаковой и не более 2–3 мм.
Цветовую кодировку кассет следует использовать для различения различных типов тканей, подлежащих обработке.

Срезы, которые необходимо предоставить после сбора образца радикальной мастэктомии
После сбора образца радикальной мастэктомии необходимо предоставить следующие срезы:

четыре среза опухоли с прилегающей паренхимой МЖ;
сосок и ареола;
кожа, покрывающая опухоль;
глубокий край основания;
любая подозрительная серо-белая область;
подмышечные лимфатические узлы;
лимфатические узлы 3-го уровня от верхушки, если они доступны.

Срезы, которые необходимо предоставить после сбора образца после органосохраняющей операции

участки опухоли с прилегающей МЖ;
кожный или сосковый лоскут, если он имеется;
срез МЖ из непораженных участков;
края: верхний, нижний, медиальный, латеральный, передний (при наличии кожи), задние подмышечные узлы.